Фермент, выделенный из печени
млекопитающих, найден в лейкоцитах и фибробластах. Очищенный фермент имеет
молекулярную массу около 165 000 и, вероятно, состоит из двух равных по размеру
субъединиц. Оптимум рН 7,0, фермент обладает высоким сродством к кофактору
5-дезоксиаденозилкобаламину. Его активность определяется в процессе инкубации
образца с радиоактивными субстратами (14С-метилмалонатом, 3Н-метилмалонатом или
14С-пропионатом) при 37° С и рН 7,3-7,4 в течение 30- 300 мин. Активность
фермента выражается либо количеством освобожденного 14СОг, поглощенного
щелочью, либо количеством радиоактивного сукцината. Последний может быть
экстрагирован эфиром и отделен от субстрата бумажной хроматографией, его
содержание измеряют с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика [Rosenberg
et al, 1968b; Rosenberg, Lillejegvist, Hsia, Rosenbloom, 1969; Morrow et al,
1969].
Введение фармакологических доз витамина
В12 (кобаламина) некоторым больным
приводило к улучшению их состояния. Это позволило выделить три
дополнительные формы метилмалоновой ацидемии.
1. У некоторых больных, реагирующих на
введение витамина В12, недостаточность мутазы корректируется in vitro
добавлением кофактора 5-дезоксиаденозилкобаламина, недостаточность которого у
этих больных, по-видимому, является результатом дефекта процесса его синтеза из
кобаламина [Rosenberg et al, 1968; Morrow et al, 1969].
2. Нарушение в обмене кобаламина на
ранних стадиях приводит к недостаточности 5-дезоксиаденозилкобаламина и
метил-кобаламина (вовлекаемого в обмен гомоцистина), что в свою очередь ведет к
развитию нарушений, характеризующихся метилмалоновой ацидемией и гомоцистинемией
[Mudd et al, 1969].
3. Недавно описано нарушение транспорта
витамина В12, облегчаемого транскобаламином II, в клетки больных с
метилмалоновой ацидемией [Rosenberg et al, 1973].
Описана недостаточность у пациента
другого фермента - метилмалонил-КоА-рацемазы (К.Ф. 4.1.99.1.) [Kang et al,
1972]..
Недостаточностью этого фермента трудно объяснить наличие гиперглицинемии
и гиперглицинурии, характерных для данного заболевания. Фермент выделен из
сердца свиньи и печени человека, крысы и быка.
