Цистатионинсннтетаза, очищенная из
печени крыс, состоит по крайней мере из двух субъединиц и требует в качестве
кофактора пиридоксальфосфат. Предполагают, что фермент обладает
серин-дегидратазной активностью, однако очищенный из печени крыс фермент не
обладал ни этой, ни цистатиониназной активностью [Kashiwamata et al., 1970;
Kimura, Nakagawa, 1971].
При классических формах гомоцистинурии
отмечается недостаточность фермента в печени, головном мозге, культурах
фиб-робластов и лимфоцитов [Mudd et al., 1964]. Для метилирования гомоцистеипа
в метионин требуется витамин Bi2 и в реакцию вовлекается
метилентетрагидрофолатредуктаза. Таким образом, известны три генетических дефекта,
которые могут быть связаны с гомоцистинурией: нарушение всасывания или
биосинтеза витамина В12, позднее влияющие на активность
№-метил-тетрагидро-фолатметилтрансферазы. Третий момент - это повреждение
метилентетрагидрофолатредуктазы [Rosenberg et al., 1968; Mudd et al., 1969;
Mudd et al., 1972].
У некоторых больных гомоцистинурией,
вызванной недостаточностью цистатионинсинтетазы, в ответ на введение больших
доз пиридоксина (витамина В6) наблюдается увеличение синтеза мутантного
фермента. Mudd (1974) показал, что даже незначительное увеличение активности
этого фермента приводит к появлению клинических проявлений и биохимических
изменений. Тот факт, что способность отвечать на пиридоксин постоянно
коррелирует у сибсов, предполагает существование генетических различий между
этими двумя группами [Uhlendorf et al., 1973]. Mudd (1974) показал, что у
нечувствительных групп практически но выявляется ферментативной активности, а в
группах, отвечающих на введение пиридоксина, обнаруживается незначительная, но
измеримая активность.
Определение активности фермента
проводится следующим образом: исследуемую ткань или жидкость инкубируют с
142-сери-ном, пирпдоксальфосфатом, ЭДГА и буфером, рН 8,3-8,6 (это рН, при
котором цистатиониназа имеет низкую активность) при 37° С в течение 30 мин.