При заболевании Krabbe дефект фермента
не может быть показан с помощью этих простых субстратов. Однако имеется
выраженная недостаточность фермента по отношению к галактоце-реброзиду [Suzuki,
Suzuki, 1970, 1971]. Этот лизосомальный фермент реагирует с
галактоцереброзидами, содержащими незамещенные или а-оксижирные кислоты.
Активность фермента не зависит от длины цепи жирных кислот [Bowen, Radin,
1968].
Активность фермента определяется в процессе
инкубации образца с бычьим галактоцереброзидом и меченой галактозой в течение 3
ч при 37° С и рН 4,5 в присутствии детергента для эмульгирования жиров.
Содержание освобожденной в ходе реакции галактозы находят с помощью жидкостного
сцинтилляционного счетчика [Suzuki,- Suzuki, 1970; Bowen, Radin, 1969].
Лактизилцерамидоз проявляется
нейродегенеративными изменениями и гепатоспленомегалией у подростков. Его
четкое описание было приведено не так давно [Dawson, Stein, 1970], однако
некоторые ранние случаи, возможно, были описаны под названием болезни Ниманна -Пика (см.
Raine, 1969; 1970). Подобно лей-кодистрофии Krabbe, заболевание связано с
недостаточностью B-D-галактозид-галактогидролазы. Прп лактозплцерамидозе накопленные липиды состоят в основном из
лактознлцерамида.
Фермент, обнаруженный в печени и
культуре кожных фибробластов, гидролизует лактозилцерамид.
В тканях найдены несколько галактозидаз
с различной субстратной специфичностью. Три фермента использовали в качестве
субстрата 4-метилумбеллиферил-В-В-галактозид; при ганглиозиде липа 1 и 2
наблюдается недостаточность некоторых из них [OBrien, 1969]. Ферментный дефект
при лактозилцерамидозе не выявляется при использовании этого простого
галактозида. Для оценки ферментативной активности необходимо применять эмульсию
6,6-ЗН-лактозил-церамида, приготовленную в присутствии таурохолата натрия.
Меченая галактоза выделяется и радиоактивность определяется с помощью счетчика
[Danson, 1970].
