Активность фермента определяется в
процессе инкубации образца с фенолфталеин-6-Б-глюкуронидом, 4-нитрофенил-6-Б-глю-куронидом
или 4-метилумбеллиферил-В-Б-глюкуронидом при рН 4,5-5,0 в течение 180 мин при
37° С. Количество освобожденного красителя находят колориметрически или
флуориметрически в щелочи [Hultberg, Ockerman, 1972; Sly et al., 1973].
В основе болезни Фабри лежит
недостаточность а-Б-галактозпд-галактогидролазы, приводящей к накоплению
трпгексозилцерами-да в тканях. Этот ферментный дефект определяется геном,
находящимся в Х-хромосоме, поэтому клинические симптомы особенно выражены у
гемизиготных мужчин, тогда как у гетерозиготных женщин проявления болезни
незначительны.
При этом заболевании, характерном для
молодого возраста, происходит жировая инфильтрация различных тканей: кожи, что
вызывает популезную сыпь на туловище и ягодицах; легких, что приводит к
нарушению вентиляции; почек, в результате чего появляются нарушения функций
канальцевого и клубочкового аппаратов, уремия и гипертония, а также
сердечно-сосудистой си-
Фермент обнаружен в тканях печени,
почек, селезенки, слизистой оболочки кишечника, лимфатических узлах, сердца,
лейкоцитах, культуре кожных фибробластов, сыворотке крови и моче. Ткани
человека содержат термостабильную и термолабильную формы фермента; при болезни
Фабрп выявлена недостаточность последней [Desnick et al., 1973].
Для определения активности применяют два
метода.
1. Гидролиз р-нитрофенилгалактозпда пли
4-метнл-сумбелли-ферилгалактозида с последующим определением содержания
продуктов колориметрическим или флуорнметрпческнм методом [Kint, 1970].
2. Гидролиз радиоактивного
трнгексозидцерамнда и определение концентрации меченой галактозы с помощью
жидкостного сцинтилляционного счетчика [Brady et al, 1967].
