Активность определяют в процессе
инкубации этого меченого мукополисахарида с тканевым образцом при 37° С и рН
4,0 в течение 20 ч. Для осаждения непрореагировавшего мукополисахарида в
инкубационную пробу добавляли этанол. Содержание освобождающегося в этих
условиях 35 S-сульфата в супернантанте измеряли с помощью жидкостного
сцинтилляционного счетчика [Bach et al, 1973].
Хотя мукополисахаридозы типа 3 А и 3 Б
клинически неразличимы, патогенетически они обусловлены недостаточностью
различных ферментов. Кроме того, мукополисахариды, обнаруживаемые в моче, имеют
различные электрофоретические профили при этих двух типах нарушений [Lewis et
al, 1974]. Эти заболевания характеризуются сходными, но менее тяжелыми
симптомами, чем мукополисахаридоз типа 1 Н. Задержка роста, карликовость,
скелетные аномалии, помутнение роговицы и гепатоспленомегалия выражены
незначительно, однако у больных наблюдаются серьезные нарушения умственной
деятельности. В моче выявляются значительные количества гепарансульфата.
Эта ферментная аномалия изучена еще
недостаточно полно, хотя есть предположение о вовлечении в патогенез
сульфамида-зы, поскольку освобождение неорганического сульфата из (N-коьцевого
сульфата)-О-сульфатированного гепарансульфата в культуре кожных фибробластов у
больных было нормальным. Активность по отношению к N-сульфатированному гепарану
или гепаринсульфату в лейкоцитах и фибробластах значительно снижена [Kresse,
1973].
Активность фермента определяется в процессе инкубации образца с
renapira-N-35S04 при рН 5,0 в ацетатном буфере при 37° С в течение 4 ч.
(Фермент ннгпбируют цитратом и фосфатом.) После инкубации образец удаляют, а
освобожденный неорганический сульфат отделяют от гепарино сульфата
хроматографией на бумаге, а его количество определяют с помощью жидкостного
сцинтилляционного счетчика [Kresse, 1973].
