1-14С-галактоза-1-фосфат (или
1-14С-галактозу) инкубировали при 37° и рН 7,5-8,7 с образцом (или с интактной
суспензией эритроцитов) и меченый УДФ-галактозный продукт отделяли от
непрореагировавшего субстрата бумажной хроматографией, ионообменной
хроматографией или адсорбцией на активированном угле и затем оценивали
радиоактивность продукта [Robinson, 1963; Gitzelmann, 1967; Bertoli, Segale,
1966; Ng et al., 1967; Inouye et al., 1968].
Это заболевание подобно фукозидозу и
сходно с синдромом Hurler (мукополисахаридоз типа I Н). Его течение
характеризуется гепатомегалией и спленомегалией, мышечной гипотонией, костной
аномалией и помутнением хрусталика. Смертельный исход наблюдается через
несколько лет после заболевания [Kjellmann et al., 1969]. Autio и сотр. (1973),
Norden
Фермент найден в печени, головном мозге,
лейкоцитах и плазме крови. а-Маннозидаза печени человека является
лизосомаль-ным ферментом с рН-оптимумом 4,0-4,5, гомогенна при гель-фильтрации,
при изоэлектрофокусировании дает единственный широкий пик, свидетельствующий,
возможно, о полидисперсности. Для проявления активности фермента необходимо
присутствие ионов цинка [Hultberg, Ockerman, 1972; Autla, Convit, 1973].
У одного больного была выявлена
недостаточность этого фермента в печени, селезенке и головном мозге [Hultberg,
1970], при этом активность других лизосомальных ферментов была нормаль-вой или
увеличенной. У некоторых больных это подтвердилось позже данными, полученными
при биопсии печени. Не установлена до сих пор возможность использования плазмы
и лейкоцитов для диагностики этого заболевания.
Ферментативная активность определяется в
процессе инкубации 4-метилумбеллиферил- или 4-нитрофенил-а-Б-маннозида при рН
4,0-4,5 и 37° С с образцом в течение 5 ч. Количество 4-метил-умбеллиферона или
4-нитрофенола, образующегося в процессе реакции, измеряют спектрофотометрически
или флюориметриче-ски после добавления щелочи {Hultberg, Ockerman, 1972; Avila,
Vonvit, 1973].
