Описано три метода определения
ферментативной активности. Плазму инкубируют при 37° С, содержание
холестерина или эфиров холестерина определяют с помощью газовой хроматографии
через разные промежутки времени. Считается, что исследования с использованием
коротких временных промежутков предпочтительны, так как в них находят отражение
начальные скорости реакций.
Плазму инкубируют при 37° С с
альбуминстабилизирован-ной эмульсией радиоактивного холестерина и
термоинактивиро-ванной гомологичной плазмой. Эфиры холестерина затем отделяют
методом тонкослойной хроматографии и их содержание оценивают с помощью счетчика
[Glomset, Wright, 1964].
Плазменный фермент, инактивированный
дисульфидом, инкубируют с радиоактивным холестерином с ЛВР. Реактивация
фермента осуществляется с помощью тиолов. Концентрацию эфиров холестерина
определяют в процессе дальнейшей инкубации [Stokke, Norum, 1971].
Метахроматпческая лейкодистрофия
относится к нейродегенера-тивным заболеваниям и характеризуется прогрессирующим
параличом и гипотонией. Клинические проявления отмечаются примерно в возрасте 2
лет, через несколько лет после начала болезнь обычно заканчивается летальным
исходом. В основе биохимических нарушений лежит накопление сульфатидов
(сульфатидный липидоз) вследствие недостаточности изофермента А -
арилсульфатазы. Иногда болезнь начинается позже, даже во взрослом периоде, но
эти случаи могут быть обусловлены другими вариантами ферментного дефекта
[Austin et al, 1965; Jatzkewitz, Mehe, 1969].
Хорошо известный вариант болезни,
связанный с кислой кополисахаридурией, вызывается недостаточностью арисульфатаз А, В, С и сульфатазы стероидов
[Murphy et al, 1971].
Для исследования активности сульфатазы обычно применяли
4-нитрокатехолсульфат или 4-нитрофенилсульфат в качестве субстратов. Эта
активность обозначается как арилсульфатазная.
