Алкаптонурия представляет исторический
интерес, поскольку привела Garrod (1908) к заключению о существовании
врожденных нарушений обмена. Основными проявлениями алкапто-нурии являются
охроноз, артриты и потемнение мочи вследствие экскреции очень больших количеств
гомогентизиновой кислоты.
Предположение Garrod о том, что
наблюдаемые изменения вызваны блокированием обмена ароматических веществ, было
впослед-ствие подтверждено La Du и др. (1958). У больных с алкаптону-рией в
печени и позднее в почках [Zannoni et al., 1962] была выявлена недостаточность
фермента гомогентнзат: кислород-1,2-оксидоредуктазы, известной под названием
окспдазы гомогентизиновой кислоты. Этот фермент катализирует следующую реакцию:
гомогентнзат-г-4-малеплацетоацетат.
Этот фермент, присутствующий в
растворимой клеточной фракции, обладает высокой активностью в ткани печени и
почек, но отсутствует в других тканях [Crandall, Halikis, 1954; Cran-dall,
1954]. Для проявления активности необходимы свободные сульфгидрильные группы и
присутствие ионов железа (Fe++). Фермент инактивируется различными хинонами.
Исследования с меченым 18Ог показали, что оба кислородных атома в реакции
происходят из атмосферы [Suda, Takeda, 1950; Schepartz, 1953а, b; Crandall et al.,
1958].
Максимальная активность фермента
проявляется при рН 7,0. Фермент не окисляет вещества, родственные
гомогентизиновой кислоте, так же как этиловый эфир, лактон, производные хипона,
опроксифенилуксусные кислоты и гентизиновую кислоту [Suda, Takeda, 1950;
Crandall, 1955]. Для определения активности оксидазы гомогентизиновой кислоты
используют следующие методы. Гомогенат печени или почек инкубируют в сосудиках
Варбурга с гомогентизиновой кислотой и буфером рН 7,2 при 37° С. Поглощение
кислорода регистрируется манометрически через 10-минутные интервалы [Edwards,
Knox, 1955].
