Устойчивость к воздействию тепла и
мочевины, а также ингибирование фенилаланином обеспечивают возможность
определения изоферментного состава сыворотки крови путем сравнения результатов
исследования данной сыворотки с результатами, полученными при изучении тканевых
экстрактов. Ряд отдельных измерений, высокая аналитическая точность,
необходимая при выполнении сравнительных исследований обработанного и
необработанного материала, а также этапы вычислений делают эти методики слишком
сложпыми или ненадежными для серийного применения в большинстве лабораторий.
Однако при наличии автоматизации применение этих методик значительно
облегчается [Statland et al., 1972].
Кроме технических трудностей, описанных выше, неизбирательные методики
менее надежны при определении изофермент-ного состава сыворотки с нормальной
или слабо повышенной фосфатазной активностью по сравнению с сывороткой с
высокой активностью фосфатазы. Оценить вклад каждой фракции в общую фосфатазпую
активность сыворотки можно только комбинированием нескольких методик, тогда как
аномальные (вариантные) изоферменты или желчную фосфатазу в сыворотке крови таким
образом идентифицировать невозможно. По этой причине возрастает популярность
избирательных методов с электрофоретическим исследованием сыворотки и
выявлением изоферментов щелочпой фосфатазы при помощи красителей. Несмотря на
то что существует множество сред разделения и окрашивающих методик, в
лаборатории автора в течение 5 лет использовалось параллельное разделение на
ацетатцеллюлозе сыворотки, предварительно прогретой при 56° С в течение 10 мин,
и необработанной сыворотки и окрашивание при помощи индигогенных субстратов
[Anido et al., 1972]. Данная процедура может быть рекомендована в качестве
удобного н надежного метода идентификации изоферментов щелочной фосфатазы в
клинических лабораториях.
