Метод определения активности фермента, основанный на ингибировании 5-нуклеоти-дазы никелем, разработанный Campbell (1962а), широко использовался в клинической практике [Schwartz, 1972], однако относительно вклада неспецифической щелочной фосфатазы в наблюдаемую при этом активность 5-нуклеотидазы этой точки зрения ранние сообщения о распространении этого лет В тканях Должны быть приняты с известной долей ьторожности [Schwartz, Bodansky, 1965]. Клинические наблюдения показывают, что высокие сывороточные активности этого фермента отмечаются при заболеваниях гепатобилиарного тракта, в то время как при заболеваниях костной ткани этот показатель не выходит за пределы нормы. 5-нуклеотидаза обнаружена в рядо тканей человека, включая печепь [Song, Bodansky, 1966], щитовидную железу и аорту, а также костную ткань [Belfield, Goldberg, 1973]. Результаты ранних исследовании этого вопроса обобщены Bodansky и Schwartz (1968).
Beckmann и др. (1969) проводили оценку активности неспецифической щелочной фосфатазы при помощи второго определения активности со смесью 2-АМФ и З-АМФ. Результаты этого определения вычитали из активностей, полученных в присутствии 5-АМФ в качестве субстрата. Другим методом пользовались Ipata (1967), Belfield и Goldberg (1968), Persijn и др. (1968) и Leybold и др. (1969), которые вместо измерения количества отщепляемого фосфата определяли накопление образующегося аденозина при действии адепозиндезаминазы:
Количество образующегося аммиака могло быть измерено при помощи реакции Berthelot [Persijn et ah, 1968; Belfield et ah, 1970] или же исчезновение аденозина могло быть прослежено при помощи постоянной регистрации снижения поглощения при 265 им [Belfield, Goldberg, 1969; Leybold et ah, 1969]. Последний метод разработан для определения аденозина Kalckar (1947) и применен в исследовании 5-нуклеотидазы Segal и Brenner (1960).