Belfield и Goldberg (1968) обнаружили, что активность неспецифической щелочной фосфатазы может быть снижена при введении в реакционную смесь достаточного для насыщения этого фермента количества В-глицерофосфата. Так как щелочная фосфатаза имеет большее сродство к В-глицерофосфату по сравнению с 5-АМФ, то активность этого фермента по отношению к 5 -АМФ значительно понизится. В качестве конкурирующего субстрата может выступать также фенилфосфат .
Новый принцип был назван Belfield и Goldberg отвлечением мешающего фермента, а группой Dutch - конкурентным сохранением субстрата.
Описаны также методы с применением НАД-Н-зависимых систем, при которых образующийся в ходе реакции дезаминировашия аденозина аммиак служит субстратом для глутаматдегидрогеназы в присутствии избытка а-кетоглутарата и [Ellis et ah, 1970; Ellis, Goldberg, 1972а].
Повышенные сывороточные активности 5-нуклеотидазы отмечаются при гепатобилиарных заболеваниях, особенно при механической желтухе, при которой изменения активности этого фермента параллельны изменениям активности щелочной фосфатазы. При деформирующем остите (болезнь Педжета) и других заболеваниях костной ткани тем не менее активность 5-нуклеотидазы остается в нормальных пределах [Dixon, Purdom, 1954; Young, 1958]. Эти результаты были подтверждены позднее при использовании новейших методик. Hill и Sammons (1967) обнаружили, что 5-нуклеотидаза может быть таким же показателем функции печени, как и щелочная фосфатаза, и даже более специфичным вследствие меньшего изменения активности нуклеотидазы при заболеваниях костной ткани. Они предположили, что высокие уровни активности при заболеваниях печени в большей степени обусловлены застоем желчи, чем повреждением печеночных клеток.