Клинический интерес к пируваткиназе значительно возрос после открытия того факта, что при определенных наследственных гемолитических анемиях в эритроцитах больных обнаруживается недостаточность этого фермента. Пируваткиназа также применяется в качестве вспомогательного фермента при определении креатинкиназы по методу Tanzer и Gilvarg (1959). Этот фермент
В физиологических условиях пируваткиназа является регуля-торным ферментом гликолиза и гликонеогепеза, и равновесие реакции сильно сдвинуто в сторону образования пирувата. Реакция активируется ионами калия, но этот эффект нивелируется ионами натрия.
Активность цируваткиназы может быть определена при помощи лактатдегидрогеназы в качестве индикаторного фермента, окисление НАД-Н при этом измеряется спектрофотометрически [Beisenherz et al., 1953].
В тканях человека и животных пируваткиназа представлена в виде множественных форм. Эритроциты человека содержат быстро мигрирующий изофермент; мозг, сердце, лейкоциты и скелетная мускулатура - одиночную медленную фракцию; печень - обе фракции, в то время как в почках имеется компонент, характеризующийся промежуточной подвижностью [Bigley et al., 1968]. Boivin и Galand (1968) обнаружили различия в константах Миха-элиса для фосфоенолпирувата: фермент из нормальных эритроцитов имел Кт, равную 1,6 ммоль/л, в то время как из эритроцитов с недостаточностью пируваткиназы - 0,31 ммоль/л. Sachs и др. (1968) показали, что фермент из эритроцитов с недостаточностью пируваткиназы имеет более высокие значения Кт, тогда как Bigley и Koler (1968) не обнаружили никаких различий в значениях Кщ как в норме, так и при недостаточности пируваткиназы.
Равновесие смещено в сторону обратной реакции, оптимум рН которой равен 6,8, в то время как скорость прямой реакции максимальна при рН 9,0. Ионы магния, марганца и кальция активируют фермент, а ионы цинка, меди, ртути и ряд тиоловых реагентов являются его ингибиторами.
