Ряд исследователей предложили улучшить условия протекания реакции, используя определенную фиксированную температуру или изменяя концентрации субстратов и кофермента [Henley, Pollard, 1955; Steinberg et al.. 1956; Bryse-Davis, Wilkinson, 1958; Henry et al., 1960]. Условия, предложенные Henry и др. (1960), близки к оптимальным, однако эти авторы проводили измерения при 32° С, т. е. при температуре, которая могла быть достигнута в кюветном отделении их спектрофотометра. Проведенное вновь изучение их метода показало, что концентрации субстрата были близки к оптимальным при 25° С и улучшенная процедура была недавно предложена в качестве сравнительного метода [Wilkinson et al., 1972].
Альтернативный сравнительный метод предложен Немецким союзом клинической химии (1972). В нем используются более высокие концентрации L-аспартата, а-кетоглутарата н малатдегидрогеназы в фосфатном буфере (рН 7,4) при 25° С. Третья рекомендация предложена Скандинавским союзом клинической химии и клинической физиологии. В пей используются похожие концентрации субстратов, по предпочитается трис-ЭДТА-буфер (рН 7,7) и температура среды 37° С. Учитывая ингибирование митохондриальной аспартаттрансаминазы фосфатными ионами [Nisselbanni. 1968] и возможность появления этого изофермента в сыворотке пациентов, нельзя использовать фосфатный буфер.
Необычно высокие активности трансаминазы обусловлены загрязнением малатдегидрогепазы апотрансаминазой, которая, как было показано, активируется пиридоксальфосфатом сыворотки [Rosalki, Wilkinson, 1959; Zimmerman et al., 1960]. В настоящее время доказательств подобного загрязпения нет, видимо, фирмы контролируют ферментные препараты и пе допускают загрязнения их апоферментом.
Введение пиридоксальфосфата в реакционную смесь [Rej et al., 1973] приводит к повышению получаемых значений в среднем на 16%, что подтверждает более ранние данные [Hamfelt, 1966]. Видимо, необходимо преинкубировать сыворотку с этим кофактором, несмотря на более ранние данные о том, что такая преинкубация не оказывает существенного влияния на результаты [Каrmen et al., 1955; Mohnn, Cook, 1957; Sail et al., 1957; Gonard, Ngnyen-Philippon, 1959].
