Медицинская диссертация

     Рекомедации по написанию, работа с литературой 
     Возможность заказать поиск защищенных диссертаций

Также выделили три электрофоретически различные фракции мито-хондриального фермента сердца свиньи. Эти фракции различались, по относительному содержанию каталитически активного и каталитически неактивного пиридоксальфосфата.
При тетразольном окрашивании, которое было использовано Boyde и Lather (1962), зоны трансаминазной активности выглядят бледными полосами на темном фоне, однако Decker и Rau (1963) предложили более простую методику окрашивания, основанную на реакции оксалоацетата с 6-бензомидо-4-метокси-т-толуидин-диазонийхлоридом [Babson et al., 1962; Schwartz et al., 1963]. В отсутствие аспартата диазониевое окрашивание не выявляло полос активности, тогда как при тетразольном методе наблюдалось отсутствие дегидрогеназы. Диазониевый метод был затем улучшен Murros и др. (1972), которые после окрашивания электрофореграмм помещали их в раствор восстановленного глутатиона. Эта процедура предотвращает потемнение фона во время сушки.
Massarat и Lang (1965) использовали метод, основанный на селективном иммуноингибировании сывороточных изоферментов-специфической антисывороткой, тогда как Boyde визуально оценивал активности изоферментов в ультрафиолетовом свете.
Очень удобный метод для клинических целей был предложен Schmidt и др. (1967), которые обнаружили, что цитозольпый фермент остается в колонке с ДЭАЭ-сефадексом, в то время как ми-тохондриальный фермент элюируется 0,008 М фосфатным буфером (рН 7,0). Цитозольный фермент элюируется раствором с повышенной ионной силой.
Первые измерения трансаминазной активности зависели от хро-матографического определения глутамата, образующегося во время инкубации кетоглутарата с аспартатом и препаратом фермента. Количество глутамата оценивали колориметрически при помощи нингидриновой реакции [Karmen et al., 1953]. Эта методика была слишком утомительной и очень капризной, чтобы можно было использовать в клинической практике.