Вследствие легкости определения активности церулоплазмина этот фермент приобрел большое значение при диагностике болезни Вильсона (гепатолентикулярная дегеперация). Применяются обычно два метода, каждый из которых включает ферментативное окисление р-фенилендиамина. При манометрическом методе Holmberg и Laurell (1951а) реакция проходит в аппарате Варбурга, измеряют скорость потребления кислорода. Результаты выражают в микромолях потребляемого кислорода за минуту на 1 л сыворотки в определенных условиях.
Простой колориметрический метод разработан Ravin (1956). Инкубационная смесь сыворотки, субстрата и ацетатного буфера (рН 6,0) подобна смеси, используемой при манометрическом методе. В качестве контроля используется также смесь, в которую добавлен азид. После 1 ч ингибирования при 37 °С реакцию останавливают добавлением азида и оптическую плотность опытного раствора, разведенного соответствующим образом, определяют при 530 нм. Точкой отсчета служит оптическая плотность аналогичным образом разбавленного контрольного раствора. В этих условиях поглощение нормальной сыворотки имеет значение 0,1-0,3 оптических единиц при длине светового потока 1 см. Отмечена превосходная корреляция между значениями, полученными этим и манометрическим методами. Колориметрический метод модифицирован для использования в автоанализаторе.
АКТИВНОСТЬ ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Активность сывороточного церулоплазмина заметно снижена при гепатолентикуляриой дегенерации. Содержание меди в сыворотке крови также снижено.
Низкие уровни церулоплазмипа, что является нормальным для новорожденных, отмечаются также при нефротическом синдроме [Trip et al., 1968]. Значения, значительно превышающие нормальные пределы, часто отмечаются в поздних стадиях беременности, а также у женщин, принимающих противозачаточные средства: это является отражением повышения сывороточной фракции 2-глобулинов.
