Несмотря на то что обычная разновидность фермента А4-очень похожа на форму В+ по своей структуре, она имеет немного более высокий оптимум рН. При помощи анализа продуктов расщепления двух ферментов трипсином Yoshida (1967, 1968) установил, что различия между ними заключаются в основном в замене остатка аспарагиновой кислоты фермента A-f- на аспарагин в форме А+. Подобные единичные аминокислотные замены соответствуют различиям, наблюдаемым при анализе гемоглобина А и гемоглобина S.
Принципиальная трудность измерения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в гемолизатах при помощи определения количества образующегося НАДФ-Н связана с тем, что продукт реакции 6-фосфоглюкопат служит субстратом для 6-фосфоглюко-натдегидрогепазы, которая также присутствует в гемолизате и также восстанавливает НАДФ+. Часть образующегося НАДФ-Н может быть результатом течения сопутствующей ферментативной реакции. Glock и McLean (1953) предположили, что это можно избежать посредством отдельного определения активности 6-фос-фоглюконатдегидрогеназы в гемолизате и вычитанием дапной активности из общей активности обоих ферментов, измеряемой в смеси глюкозо-6-фосфата с 6-фосфоглюконатом. Тем не менее большинство исследователей не проводят никакой коррекции на 6-фосфоглюконатдегидрогеназу [Marks, 1958; Linkham, Lenhard, 1959; Prankerd, 1962]. Это возможно при использовании рН 7,6, что несколько ниже оптимума для 6-фосфоглюконатдегидро-геназы, и при удалении цистеина, который активирует мешающий фермент. Более того, при обычно используемом спектрофотометрическом методе измеряется начальная скорость реакции. В момент добавления глюкозо-6-фосфата концентрация 6-фосфо-глюконата равна нулю, и за время реакции (1-3 мин) маловероятно, чтобы продуцируемые количества 6-фосфоглюконата были достаточными для насыщения 6-фосфоглюконатдегидрогеназы. Следовательно, трудно допустить, чтобы получаемая ошибка была очень серьёзной.
