Возможная диффу-зия формазана из сильно
окрашенных зон в менее окрашенные приводит к подобной ошибке.
Другой проблемой является эффект отсутствия
дегидрогеназы, наблюдаемый в случае, когда окрашивающаяся смесь не содержит
субстрата. Слабо окрашенные полосы, выявляемые в отсутствии лактата, как
кажется, обусловлены действием алкоголь-дегидрогеназы [Shaw et al., 1965,
1967]. По мнению Beutler (1967), этот эффект может быть значительно уменьшен
при помощи осторожного высушивания среды и реагентов при 80° С тем, чтобы удалить
следы алкоголя. Тем не менее широко используемые электрофоретические среды,
такие, как крахмал, ацетатцел-люлоза и т. д., содержат группы, родственные
группам лактата, которые принимают участие в некоторых реакциях с
лактатде-гидрогеназой [Falkenburg et al., 1969]. Несмотря на трудности в
количественной оценке, зонный электрофорез остается удобным методом для
использования в клинической лаборатории. Применяемые ранее среды, такие, как
бумага, крахмал, агар и т. д., в настоящее время в основном заменены на
акриламидный гель и ацетатцеллюлозу, так как последние материалы значительно
более химически однородны по сравнению с первоначально использованными.
Ацетатцеллюлоза требует минимальной предварительной обработки перед
исследованием сыворотки или других ферментных препаратов и сейчас выпускается в
виде целлогеля (Chemetron, Milan). Эта форма геля дает превосходную
воспроизводимость результатов.
Шестой изофермент лактатдегидрогеназы (ЛДГ-х)
встречается в яичках взрослых особей наряду с пятью изоферментами, которые
обнаруживаются в других тканях [Blanco et al., 1963; Goldberg. 1963]. ЛДГ-х
имеет электрофоретическую подвижность, промежуточную по отношению к
подвижностям ЛДГ-3 и ЛДГ-4. Этот изофермент, видимо, связан со сперматогенезом,
так как не обнаруживается в яичках неполовозрелых особей.
