Атипичный фермент отличается от нормальной формы
некоторыми своими каталитическими свойствами и своей чувствительностью к
ингибированию тиомочевиной, которая активирует нормальный фермент. Обе формы
имеют сходные электрофоретические и хрома-тографические свойства.
Гетерогенность алкогольдегидрогеназы печени
человека была недавно установлена при помощи гель-электрофореза Murray и др.
(1971), которые обнаружили, что изоферментный спектр печени заметно отличается
от такового слизистой оболочки желудка. Они также продемонстрировали заметные
изменения элек-трофоретнческой картины в онтогенезе и подтвердили данные
Pikkarainen и др. (1967), что фетальная форма отличается от фермента взрослых
особей оптимумом рН и значением Кт.
Активность алкогольдегидрогеназы в сыворотке
крови может быть измерена спектрофотометрически по методу Bonnichsen и др.
(1955), согласно которому сыворотку добавляют к раствору НАД4 в пирофосфатном
буфере (рН 9,6). Реакция инициируется ; этанолом, при этом измеряют увеличепие
оптической плотности при 340 пм в минуту. Активность фермента в Е/л
рассчитывают, исходя из молярного коэффициента экстинкции (6,22 на 1 мк/моль).
Этот метод модифицирован Mezey и др. (1968), которые включили этанол в
преинкубационную смесь, а реакцию запускали добавлением кофермента. Для учета
других дегидрогеназных реакций, восстанавливающих НАД4, особенно лактатдегидрогеназы,
действующей на сывороточный лактат, проводилась контрольная реакция, при
которой этанол не добавляли в реакционную смесь. Mezey с сотр. обнаружили, что
модифицированный метод давал более воспроизводимые результаты, чем исходный.
Проведено несколько исследований по
диагностическому применению активности алкогольдегидрогепазы в сыворотке крови,
но только Mezey и др. (1968) показали, что этот параметр может быть полезным
при острых паренхиматозных заболеваниях печени.
