Тем не менее сейчас для каждой лаборатории
появилась возможность сравнить свой собственный принятый метод с
соответствующим цитируемым методом. Обнадеживает, что Международная федерация
клинической химии учредила
экспертную комиссию с
целью стандартизации методов определения ферментативной
активности.
Уже упоминалось о субстратной специфичности
ферментов и за счет чего это достигается. Некоторые из ферментов, такие, как
алкогольдегидрогеназа, которая действует быстро только на этанол, являются
высокоспецифичпымп по отношению к своему субстрату, тогда как другие способпы
действовать на ряд аналогичных соединений. Щелочная фосфатаза является примером
последнего типа, так как она гидролизует большое число фосфатных эфиров,
включая фенил и р-питрофенил-фосфаты, р-глицерофосфат, фенолфталеинмонофосфат и
тимол-фтэленнмонофосфат, любой из которых применяется в качество субстрата для
определения активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови. По этой причине
фермент называется неспецифической щелочной фосфатазой в отличие от таких
специфических фосфатаз, как глюкозо-6-фосфатаза и 5-нуклеотпдаза.
Липаза также является относительно неспецифическим
ферментом, основпая физиологическая функция которого состоит в омылении жиров,
но она также способна гидролизовать несколько других глицерилэфиров. Методы
определения ее активности основаны на способности гидролизовать
трибутнрилглпцерпп до глицерина и масляной кислоты. Липаза зачастую действует
как не-специфическая эстераза, но ее специфичность проявляется в том, что она
действует только на эфиры глицерина.
Ферменты, которые действуют на целые серии
сходных соединений, проявляют определенные специфические структурные требования
к своим субстратам. Эстеразы, например, формируют фермент-субстратные комплексы
соединением своего активного Центра с карбоксильной группой эфира, и если
фермент неспецифичен по отношению к ряду гомологичных эфиров, то это служит
Доказательством того, что углеводородная цепочка не имеет отношения к
образованию связи.