Например, церулоплазмин-медьсодержащий фермент
имеет голубой цвет, интенсивность которого может быть использована для
спектрофотометрического определения его концентрации. Каталаза также обладает
характерным спектром поглощения. Такие ферменты встречаются крайне редко, и в
большинстве случаев в клинической практике для количественной характеристики
ферментов чаще применяют методы определения их каталитической активности, чем
методы определения их абсолютной концентрации. Ферменты проявляют
каталитическую активность при очень больших разведениях и обычно присутствуют в
биологических жидкостях, только в очень низкой концентрации по сравнению с
таковой в клетках.
Активность фермента не обязательно прямо зависит
от его концентрации, определяемой иммуиохимнческими методами, вследствие того,
что антигенные или другие свойства, выбираемые для измерения концентрации, не
связаны с каталитической активностью фермента. В то же время каталитическая активность
фермента зависит от условий внешней среды, таких, как концентрация субстрата,
наличие активаторов и коферментов, отсутствие ингибиторов, рН и температура,
которые кратко обсуждаются в последующих разделах.
Активность ферментов измеряется при помощи либо
прямого, либо непрямого определения количества потребляемого субстрата или
образующегося продукта в заданное время в специфических условиях. В прошлом
применялось большое количество различных единиц для выражеппя активности
ферментов. В клинической литературе было принято, что исследователи применяли
собственные единицы активности, поэтому существуют единицы активности
Боданского для щелочной фосфатазы (1933) или по King - Armstrong (1934),
аспартаттрансаминазы - (по Karmen, 1955), единицы Самоги для амилазы (1938).
Это не вызывало особых трудностей, когда число
ферментативных методов, применяемых клиническими лабораториями, было
незначительно. Однако значительный рост количества определяемых ферментов
привел к большим затруднениям при интерпретации и сравнении полученных
результатов.
