Из-за сходства молекулярных масс
фосфатаз кости и печени нельзя использовать такие носители, которые способны
делить вещества по молекулярным массам, например крахмальный и полиакриламидный
гели, несмотря на то что они дают более высокое разрешение. Лучше использовать
для этого ацетат целлюлозы и агар.
Обычно щелочная фосфатаза печени и
щелочная фосфатаза кости при электрофорезе в геле очень незначительно разнятся
в подвижности и даже могут частично накладываться друг на друга. Поэтому их
отличают по степени конденсации зон (полос), ибо фосфатаза печени менее
диффузно распределена в геле. Кроме того, всегда необходим какой-то надежный
электро-форетический стандарт, например сыворотка больных с уже известным
заболеванием костей или печени и, следовательно, известной электрофоретпческой
подвижностью.
Щелочная фосфатаза кишечного и
плацентарного происхождения заметно отличается от костной формы фермента не
только по данным электрофореза, но и по чувствительности к ингибиро-ваиию
L-фенилаланином [Fishman et al, 1963].
Костная щелочная фосфатаза быстрее
инактивпруется нагреванием, чем соответствующий фермент из печени: 10-минутное
нагревание сыворотки при 56° инактивирует более 80% костной фосфатазы и
50-80% фосфатазы печени. Для большей
достоверности метода необходимо строгое соблюдение стандартных условий
нагревания и стабильного рН [Moss et al, 1972]. Наконец, еще более показательно
сравнение электрофоретической подвижности двух видов изоферментов, подвергшихся
нагреванию. Исследование электрофоретической подвижности изоферментов щелочной
фосфатазы проводится для диагностики остеобластических метастазов при
злокачественных опухолях, гепатобилиарных заболеваниях и других видах
дифференциальной клинико-биохимической диагностики.
