Характерной особенностью комплемента
является его лабильность. Инактивация комплемента осуществляется с помощью
целого ряда агентов (подогревание при 55- 60°С, длительное хранение, облучение
ультрафиолетовыми лучами, встряхивание, фильтрация через бактериальные свечи,
добавление каолина, кислот, щелочей, слабых и концентрированных растворов солей,
дистиллированной воды, алкоголя, эфира, хлороформа, ацетона, взвеси бактерий и
т. д.).
Были предложены различные способы
консервирования комплемента. Химические способы заключаются в добавлении к
комплементу ряда консервантов и стабилизаторов: уксуснокислого натрия,
сернокислого магния, борной кислоты и др. Лучшим из них является метод,
предложенный В. С. Калининым, и С. И. Гинзбург: добавление 5 г сернокислого
натрия и 4 г борной кислоты к 100 мл свежей сыворотки морской свинки.
Активность комплемента сохраняется более полугода.
Из двух физических методов
(замораживание и высушивание) лучшим является высушивание комплемента в
условиях вакуума (лиофильное высушивание) с последующим содержанием сухого
комплемента в ампулах, запаянных под вакуумом. Активность сухого комплемента
сохраняется на протяжении 4-5 лет.
Перед каждой постановкой реакции связывания комплемента следует
производить титрование комплемента в присутствии всех ингредиентов, участвующих
в опыте. Ингредиенты разводят в следующем порядке: разводят гемолитическую сыворотку
по трехкратному титру; готовят 3% взвесь отмытых бараньих эритроцитов или 5% взвесь:
цельной дефибринированной крови; стандартизируют взвесь на ФЭК или делают
цветную пробу (0,5 мл приготовленной взвеси бараньих эритроцитов с 2 мл
дистиллированной воды); разливают 3% взвесь бараньих эритроцитов и
физиологический раствор в 6 контрольных пробирок; уравнивают объем обоих ингредиентов и
приливают гемолитическую сыворотку к взвей эритроцитов; полученную
гемолитическую систему ставят на 30 мин. в термостат (37°) для сенсибилизации
эритроцитов; разводят в физрастворе
антигены по указанному на этикетке титру; разводят нормальную инактивированную
сыворотку 1:5 (2 мл сыворотки с 8 мл физиологического раствора) и разводят комплемент 1:10 (1 мл комплемента с 9
мл физиологического раствора или 0,5 мл комплемента с 4,5 мл физиологического раствора).
