Предварительно на коже мошонки кролика
выстригают шерсть и обрабатывают этот участок эфиром. После заражения некоторое
время рекомендуется прижимать место прокола стерильным ватным шариком. Кроликов
не подвергают рентгенооблучепию, но в день заражения вводят им по 20 мг
гидрокортизона, в последующие дни до умерщвления - по 10 мг для замедленной
выработки антител в организме животного и для развития активно подвижных
трепонем. Орхиты у большинства кроликов развиваются через 7-9 дней после
заражения; получаемые из них взвеси трепонем пригодны для приготовления
антигена и заражения здоровых кроликов. Заражение животных малоподвижными трепонемами
в недостаточном количестве удлиняет срок инкубации.
Среда выживания трепонем. Среда для
поддержания жизнеспособности трепонем является важнейшим компонентом для
реакции иммобилизации. Впервые предложили среду из 10 компонентов:
кристаллический бычий альбумин, глютатион, солянокислый цистеин, тиогликолат
натрия, пируват натрия, сложная смесь витаминов и др. Эта дорогостоящая среда
была труднодоступна для лабораторий.
В настоящее время используются более
упрощенные среды выживания трепонем. Так, вместо питательной среды успешно пользовались
либо физиологическим раствором, либо кроличьей или человеческой сывороткой,
разведенной 1:1, 1:2 физиологическим раствором.
Лишь незначительно упростили среду, применив вместо бычьего альбумина
человеческий, а в дальнейшем заменили бычий альбумин и ультрафильтрат бычьей
сыворотки 20% сывороткой барана.
Г, Б. Беленький также заменил
кристаллический альбумин человеческим и уменьшил количество глютатиона; среда в
лиофилизированном состоянии длительно сохраняла активность.
Н. М. Овчинников предложил упрощенную среду выживания трепонем
из смеси 0,2 мл 0,2% желатины и 0,15 мл кроличьей сыворотки, разведенной 1:2,
или человеческого альбумина.
Л. В. Сазонова предложила без альбуминовую среду выживания в
виде бульона из говяжьего мяса, освобожденного от жира и сухожилий;
устанавливают 7,2-7,4 путем добавления нескольких капель 20% раствора едкого
натрия.
