Для непрямого метода применяется одна
(для всех исследуемых сывороток) окрашенная флюорохромом иммунная сыворотка
против глобулина человека или животных (флюоресцирующая антиглобулиновая сыворотка)
для выявления различных видов антигенов и антител. Методика непрямого метода
проста. На предметное стекло вначале наносят антиген (взвесь микробов, срез
ткани); после просушки и фиксации наносят испытуемую сыворотку. Для образования
комплекса антиген-антитело препарат помещают во влажную камеру, затем смывают
буферным или физиологическим раствором. После промывания и просушки на препарат
наносят флюоресцирующую антиглобулиновую сыворотку, которая связывается с
фиксированными на антигене антителами исследуемой сыворотки, в результате чего
образовавшийся комплекс антиген-антитело начинает светиться. Если исследуемая
сыворотка не содержит специфических антител, свечения не наблюдается.
Метод меченых флюоресцирующих сывороток
открывает широкие перспективы обнаружения различных антигенов в
микроскопических препаратах, а также выявление антител в различных иммунных
сыворотках.
Чувствительность этого метода была
изучена на дизентерийных культурах; при гриппозной инфекции; при гонорее; при
сифилисе; при сибирской язве. В. Н. Беднова методом флюоресцирующих антител определяла
комплемент, фиксированный на комплексе антиген-антитело.
Непрямой метод реакции
иммунофлюоресценции получил большое применение в диагностике сифилиса. Реакция
отличается специфичностью, высокой чувствительностью и демонстративностью
результатов. В качестве антигена применяется тканевая бледная спирохета штамма.
Предложено несколько модификаций РИФ:
реакция ингибиции, антикомплементный метод; последняя является наиболее специфичной.
Для постановки испытуемую сыворотку разводят испытуемую сыворотку разводят; для
постановки испытуемую сыворотку
адсорбируют взвесью культуры бледной трепонемы для удаления групповых антител.
