Авторы применяют указанный антиген в
реакции связывания комплемента. Многие работы подтверждают чувствительность и
специфичность антигена, рекомендуемого авторами.
Кролика до заражения облучают, после
заражения ежедневно вводят по 10 мг кортизона на 1 кг веса. На 14-й день после
заражения кролика обескровливают, удаляют его яички, измельчают и четыре раза
экстрагируют 0,075% раствором лимоннокислого натрия. Взвесь спирохет вначале
центрифугируют (для удаления кусочков ткани) при 1000 оборотов, а затем для
осаждения спирохет при 20 000 оборотов. Осадок спирохет отмывается и
суспензируется физиологическим раствором так, чтобы в 1 мл содержалось 100 млн.
бледных трепонем. Эту взвесь прогревают на водяной бане в течение 30 мин. при
56°С, консервируют 0,3% фенолом и хранят в рефрижераторе.
Первая фаза реакции связывания
комплемента проводится в течение 30 мин. при 6°С и 30 мин. на водяной бане при
37°С; после добавления гемолитической системы опыт выдерживают еще 30 мин. при
37°С, а затем читают результаты реакции.
Из всех перечисленных спирохетных
антигенов наиболее доступным для реакции связывания комплемента является
озвученный ультразвуком антиген из культуральной спирохеты. Антигены из
тканевых трепонем мало доступны из-за сложности получения исходного материала и
крайне малым выходом готовой продукции.
Реакция иммунофлюоресценции. Обнаружение
бактериальных и вирусных антигенов в тканях животных и в культурах ткани при
помощи флюоресцирующих антител получило в
настоящее время широкое применение. Приготовление флюоресцирующих
сывороток основано на способности некоторых флюорохромов вступать в химическую
связь с сывороточными белками без нарушения их иммунологической специфичности.
Вступая в реакцию с микробными антигенами, флюоресцирующие антитела образуют
светящиеся комплексы, которые легко могут быть выявлены при люминесцентной
микроскопии с помощью специального микроскопа или обычного микроскопа с люминесцентным
устройством.