Наиболее приемлемый метод приготовления
гонококкового антигена предложила Т. И. Пак; метод положен в основу инструкции
и состоит в следующем: 8-10 штаммов гонококков, выращенных в матрасах на асцитагаре
(односуточная культура), смывают дистиллированной водой до концентрации 4 млрд.
микробных тел в 1 мл смыва. Взвесь выдерживают сначала в термостате при 37°С в
течение 24 час, затем в рефрижераторе - 5 дней при температуре 3-5°С и,
наконец, ставят на водяную баню при температуре 56-60°С на 1 час. Затем
гонококковую суспензию центрифугируют до полного просветления жидкости;
гоноэкстракт сливают и консервируют из расчета 0,1 мл формалина на 100 мл
экстракта. Титр антигена обычно колеблется в пределах от 0,02 до 0,1 мл антигена
на 1 мл физиологического раствора; хранить антиген следует в рефрижераторе.
Ориентировочный титр антигена
определяется по схеме титрования водных антигенов, а рабочий титр после этого
устанавливается на заведомо положительных и отрицательных сыворотках.
Вышеуказанный антиген широко применяется в серодиагностике гонореи, однако при
пользовании им наблюдается довольно значительный процент неспецифических
результатов (5-8%), что обусловливается примесью балластных веществ в антигене,
снижающих как его чувствительность, так и специфичность. Отдельные
исследователи в целях улучшения качества антигена делали попытки к их очистке
для получения деятельного вещества антигена в чистом виде. По данным различных
исследователей, в гонококке содержится углеводов 5-9%, липоидов-10-14%, нуклеопротеидов
- 60-65% и 13-18%-других веществ.
А. И. Дмитриев и М. В. Демидова (1935)
выделили из гонококковой культуры и использовали в качестве антигена для
реакции Борде-Жангу гонополисахарид и гонопротеин с неудовлетворительными результатами.
М. Е. Орлова получила из культуры гонококка две очищенные
фракции: полисахаридную и протеиновую. Для выделения полисахарида культура
растиралась с битым стеклом и полисахарид экстрагировался слабым раствором
щелочи. Из экстрагируемой жидкости добавлением уксусной кислоты удалялся белок,
после чего производилось осаждение полисахарида трехкратным объемом 95° спирта.
