Для постановки опыта отмеривают в три
пробирки по 0,2 мл активной испытуемой сыворотки; затем в первую и вторую
пробирки - по 0,3 мл разведенных антигенов, а в третью (контрольную) - 0,3 мл
физиологического раствора. Все пробирки встряхивают в течение 3 мин., после
чего в них добавляют по 0,75 мл 1 % взвеси не отмытой крови барана. После
встряхивания пробирки оставляют на 45-60 мин. при комнатной температуре
(18-25°) до появления гемолиза в контролях.
Регистрацию опыта производят вслед за
наступлением гемолиза в контрольных пробирках. Оценка результатов как при
реакции Вассермана: если сыворотки дают в контроле задержку гемолиза, то они подлежат
повторному исследованию с добавлением 0,1 мл любой активной сыворотки, давшей в
день постановки реакции отрицательный результат.
Для уточнения активного метода целый ряд
исследователей помимо Н. П. Черногубова предложили активные модификации с титрованием
гемолитического индекса, то есть с определением количества бараньей крови,
которое может растворить каждая исследуемая сыворотка в отдельности.
Заслуживает внимания активный метод с
титрованием гемолитического индекса, опубликованный Н. В. Нарциссовым в 1952 г.
Активная модификация Нарциссова имеет
четыре особенности: определение гемолитического индекса каждой исследуемой
сыворотки; использование естественного комплемента и гемолизина исследуемой
сыворотки; пригодны обычные антигены, применяемые в реакции Вассермана, по
титру увеличенному в 5 раза; применяется не отмытая дефибринированная баранья
кровь в виде 2% взвеси.
После определения оптимальных доз
бараньей крови ее приливают к соответствующим сывороткам в первой, второй и
третьей пробирках, и опыт помещается в термостат на 30 мин., после чего сразу
учитываются результаты, как при реакции Вассермана.
В настоящее время активные методы под
названием Реакции потребления комплемента получили широкое применение при
различных патологических процессах.
