Если содержимое пробирки по цвету соответствует, па-пример, пробирке из ряда титрования комплемента исследуемой
сыворотки (то есть дозе комплемента 0,4), то расчет ведется следующим образом.
В сыворотках здоровых лиц обычно
содержится; в данном примере содержание комплемента понижено.
При отсутствии сыворотки морской свинки
в качестве комплемента в реакции связывания комплемента допускается применять
свежую сыворотку человека. Человеческий комплемент применяется в виде смеси
активных сывороток (не более 24-часовой давности), оставшихся после предыдущей
постановки серореакции и давших отрицательный результат по реакции Вассермана и
осадочным реакциям. Консервирование производят в расчете 3 г сернокислого
натрия и 2 г борной кислоты на 100 мл активной сыворотки человека; активность
сохраняется 12-15 дней.
Для титрования человеческий комплемент
разводят физиологическим раствором 1:1 и
титруют по обычной схеме. К титру комплемента дают надбавку 30-50%.
Человеческий комплемент был испытан многочисленными исследователями: Л. С.
Резниковой , С. А. Филиной, Б. М. Гинзбург , Г. А. Змечоровской и др.
При постановке опыта РСК в объеме 2,5 мл
титрование комплемента производится также в объеме 2,5 мл.
Некоторые исследователи пользуются
факториальным титрованием комплемента, предложенным В. С. Калининым и С. И.
Гинзбург. Берется по 0,1 мл сыворотки, предназначенной для исследования, 0,9 мл
физраствора, 0,5 мл комплемента по рабочей дозе. Гемолитическая система
составляет 1 мл. Титрование производится в трех пробирках, результат
учитывается троекратно: через 10, 20 и 30 мин. нахождения пробирок в
термостате.
Если по истечении 10 мин. во всех
пробирках наблюдается полный гемолиз и лишь слабая задержка последнего в
пределах или, то рабочая доза комплемента оказывается избыточной и нуждается в
уменьшении на 0,02-0,04 мл. Если хотя бы в одной из двух пробирок по истечении
30 мин. не происходит полный гемолиз, то рабочая доза комплемента является
недостаточной - ее требуется увеличить на 0,02-0,04 мл.