Сравнительная оценка меланжерного метода
Н. М. Овчинникова и микроанаэростатный метод в модификации
У. М. Мирахмедова. На протяжении многих
лет ученые пытались упростить проведение реакции. Наибольших успехов достигли
советские ученые. В 1962 г. Н. М. Овчинников предложил простой метод
осуществления РИТ в меланжерах для подсчета лейкоцитов, при котором отпадает
потребность в сложной аппаратуре и газовом меланже. Основные условия выполнения
реакции - стерильность, наличие достаточного процента активно подвижных бледных
трепонем в антигене. Простота и доступность метода позволили широко применять
его во многих практических лабораториях Советского Союза. Модификация в
меланжерах, испытанная на десятках тысяч сывороток, дает результаты, сходные с
оригинальной РИТ. У. М. Мирахмедов проводил сравнительное изучение упрощенного
метода Н. М. Овчинникова с микроанаэростатным методом с применением газового
меланжа в его же модификации. Учитывая трудности и сложность осуществления РИТ,
заранее готовили среду, комплемент, заведомо положительные и заведомо
отрицательные контрольные сыворотки па несколько недель вперед и хранили при -
13°С, что намного облегчало работу.
Определяя РИТ по упрощенному методу Н.
М. Овчинникова, строго выполняли все указания автора, приведенные в
Методическом письме по реакции иммобилизации бледных трепонем от 1962 г.
Реакцию проводили в
меланжерах-смесителях для подсчета лейкоцитов по Н. М. Овчинникову. В опытный
стерильный меланжер набирали до метки
инактивированную испытуемую сыворотку и до метки - смесь активного комплемента с антигеном. В
контрольный меланжер набирали испытуемую инактивированную сыворотку до
метки и инактивированный комплемент в
смеси с антигеном до метки . Оба конца меланжеров зажимали заранее
приготовленными резиновыми кольцами, достигая таким путем относительно
анаэробных условий. На каждый меланжер подвешивали картонную пробирку с номером
сыворотки по журналу.
