Если рабочая доза антигена равна 0,005
мл, то на 20 мл физиологического раствора следует взять 0,1 мл антигена
(рекомендуется разводить не менее 0,1 мл антигена). Следовательно, если титр
антигена 0,002, его следует развести не менее, чем в 50 мл физиологического
раствора. Разведенный спиртовый антиген должен быть слегка опалесцирующим, но
не мутным.
Титры водных специфических антигенов из
печени и из культуральной и тканевой спирохеты значительно ниже- в пределах от
0,02 до 0,2 мл антигена на 1 мл физиологического раствора; титры спиртовых
неспецифических- от 0,002 до 0,01 мл на 1 мл физиологического раствора. Наиболее
высоким титром обладает кардиоли-пиновый антиген.
Способ разведения антигена (обычно
указывается на этикетке) может быть различным в зависимости от свойства
антигена: а) в отмеренный объем физиологического раствора вводится необходимое
количество антигена; б) к отмеренному объему антигена добавляется нужное
количество физиологического раствора; в) смешивание антигена с физиологическим
раствором может быть быстрым или медленным. Разведенные по титру антигены
вводятся реакцию в количестве 0,25 мл
(при объеме реакции 1,25 мл).
Спиртовые антигены следует хранить в
темноте при комнатной температуре (не ниже 15°С) во флаконах или пробирках под
тугой корковой пробкой. Если в результате охлаждения происходит выпадение
кристаллов холестерина, антиген ставят в термостат или на водяную баню при 55°С
(не откупоривая пробирку) до полного растворения кристаллов. Водные спирохетные
антигены следует хранить в рефрижераторе при температуре 3-5°С.
Антигены для реакции связывания комплемента не должны обладать антикомплементарными
свойствами. Отсутствие или наличие этих свойств может быть определено лишь при
параллельном титровании комплемента и в присутствии антигенов, применяемых при
постановке реакции связывания комплемента. Антиген не должен подавлять
активность комплемента более чем на 30% в сравнении с титром комплемента.
