Включив зеленый светофильтр, переводят
рукоятку гальванометра с 0 на 1 и вращением макрометрического клина стрелку
гальванометра устанавливают на нуль; после этого рукоятку гальванометра
переключают на 2 и вращением микрометрического клина стрелку гальванометра
устанавливают на 0. Гальванометр выключают.
Вместо кюветы с лизированной кровью в
правый кюветодержатель ставят кювету с растворителем; включают гальванометр,
при этом стрелка гальванометра резко отклоняется вправо от нуля. Переключают
гальванометр с 0 на 1. Вращением левого измерительного барабана (который
предварительно устанавливается на 0,00) стрелку гальванометра устанавливают на
0. Затем рукоятку гальванометра переключают на 2 и вновь стрелку гальванометра
вращением барабана устанавливают на 0. Величина оптической плотности раствора
отсчитывается по левой части барабана (можно пользоваться и правым барабаном).
Определенной концентрации эритроцитов соответствует определенный показатель шкалы
оптической плотности. Если раствор бараньих эритроцитов приготовлен правильно,
то шкала оптической плотности показывает 0,4. Если шкала оптической плотности
показывает, например, 0,45, это значит, что приготовленная взвесь содержит
более 3% эритроцитов, в чем можно убедиться, пользуясь следующим расчетом: то
есть вместо 3% взвеси приготовлена 3,4%.
Стандартизация взвеси бараньих
эритроцитов в значительной мере способствует уточнению реакции связывания
комплемента.
Гемолитическая система - это смесь
равных объемов разведенной по трехкратному титру гемолитической сыворотки и 3%
взвеси бараньих эритроцитов с плотного осадка или 5% взвеси из расчета цельной
дефибрикированной крови. Смешивание гемолитической сыворотки с эритроцитами
производится по возможности быстро, причем гемолитическую сыворотку приливают
к, взбеси эритроцитов, а не наоборот. Смесь выдерживают в термостате при 37°С в
течение 30 мин. для сенсибилизации эритроцитов. При добавлении к гемолитической
системе комплемента происходит гемолиз. Гемолитическая система является цветным
индикатором того скрытого процесса, который происходил в фазе реакции связывания комплемента.
